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水产类论文 基于表面增强拉曼光谱高灵敏快速检测水产品运输过程中添加孔雀

2018-12-02 11:20:54来源:组稿人论文网作者:婷婷

  摘要:食品安全越来越受到社会各界的关注,水产品的质量安全也极其重要。孔雀石绿是一种有毒的人工合成的有机化合物,孔雀石绿及代谢产物脂溶性无色孔雀石绿,在生物体内残留时间长,均具有高毒性、高残留、致突变、致畸性和致癌的“三致”危险。但是,由于其价格低廉,具有高效的杀菌驱虫作用,在水产品的养殖和运输过程中屡禁不止。因此,对水产品运输过程中添加的孔雀石绿及其代谢产物隐性孔雀石绿残留的检测对于保障水产品的质量安全有着重要的意义。本文从生物化学和免疫学两个方面,就现有的检测方法及其局限性以及未来的发展趋势进行系统的综述,为今后水产品运输过程中孔雀石绿的残留检测技术提供参考。

  关键词:孔雀石绿;水产品;检测

  前言:

  孔雀石绿属于有毒的三苯甲烷型的绿色染料,其具有高效的杀菌抗虫作用和价格低廉的特点,目前也没有找到其他特效药代替,相关法规对食品中孔雀石绿残留限量的规定是把孔雀石绿和无色孔雀石绿的总量作为限量指标。但是,孔雀石绿及其代谢产物隐性孔雀石绿均有较大的毒性,在生物体内残留时间长,难以消除,存在致突变、致畸性和致癌的“三致”危险。鉴于孔雀石绿的危害性,美国、加拿大、日本、欧盟等许多国家都将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。我国也在2002年5月明令将孔雀石绿列入《食品动物禁用的兽药及化合物清单》中。但是依然有不少个体户在利益的驱动下,在水产品的运输过程中添加孔雀石绿。为了保护我国水产品的质量安全,保护生态环境,打破贸易壁垒,我国对水产品中孔雀石绿的残留检测越来越严格。目前,国内外水产品中孔雀石绿的残留检测方法主要有理化检测法和免疫学检测法两大类。理化检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、薄层色谱法(TLC)、分光光度法(UV-VIS),液相色谱质谱联用检测法(HPLC-MS)等,免疫学检测法主要包括酶联免疫检测法。近年来新兴起表面增强拉曼光谱法(SERS)。本文从孔雀石绿的作用、毒性机理、检测方法、未来发展趋势等方面进行阐述,为今后水产品运输过程中孔雀石绿及其代谢产物的残留量的检测技术的发展提供参考。

  1.孔雀石绿的简介

  1.1孔雀石绿的理化性质及其来源

  孔雀石绿(malachitegreen,MG),别名为孔雀绿、碱性绿、盐基块绿、苯胺绿、中国绿等,其化学名是四甲基代二氨基三苯甲烷,分子式为C23H25ClN2,分子量为346.4。孔雀石绿是一种有毒的人工合成的有机化合物,它是由1mol的苯甲醛和2mol的二甲苯胺在浓盐酸混和下,加热缩合而成隐色素碱后被二氧化铅氧化制得。孔雀石绿属于三苯甲烷型的绿色染料,是具有金属光泽的结晶状固体,它极易溶于水,其水溶液为蓝绿绿色,溶于乙醇、甲醇和戊醇等溶剂。孔雀石绿和隐性孔雀石绿的结构式如下:

  1.2 孔雀石绿的作用及其机理

  孔雀石绿在1933被证实具有杀菌、驱虫的作用,它能在细胞分裂时期阻碍蛋白肽的生成,从而使细胞中的氨基酸分子无法转化成为蛋白肽,因儿抑制了细胞分裂,具有抗菌杀虫的作用[2]。由于孔雀石绿价格便宜、效果显著,因此,从1993年开始,孔雀石绿被当作杀虫剂、防腐剂广泛应用于预防和治疗水产甲鱼、黄鳝、鳗鱼、鳜鱼等鱼类中的鳃霉病、水霉病、烂鳃病、小瓜虫病以及蟹类的寄生虫病、四膜虫病、纤毛虫病等,使得各类病症虫害、鱼身的菌体感染得到有效的控制。在工业上,孔雀石绿曾经被当作染料在制陶业、皮革业、纺织业、细胞化学染色剂、食品染色剂等方面广泛应用。在水产运输过程中,使用孔雀石绿浸泡后,能够有效地延长鱼类的存活时间,达到良好的保鲜效果。

  1.3 孔雀石绿的代谢

  自1990年开始,国内外学者通过陆陆续续的研究发现,孔雀石绿进入人体或者动物体内后,经过一系列的生物转化,还原代谢成不溶于水的无色孔雀石绿,由于它是脂溶性的,因此,无色孔雀石绿的残留毒性比孔雀石绿更高。孔雀石绿和它的代谢产物无色孔雀石绿会快速地蓄积在组织中,即使添加孔雀石绿以防治鱼卵孵化过程中的水霉病,最终也会检测出鱼种或成鱼中的孔雀石绿。

  高露蛟等用浓度分别为0.1 mg/L和0.2mg/L的孔雀石绿对欧洲鳗鲡鱼苗浸泡24h之后再转入清水之中养殖,研究表明,鳗鲡的肌肉中孔雀石绿和代谢产物无色孔雀石绿都需要很长的消除时间,养殖90d后肌肉中的孔雀石绿才可以完全代谢;但是无色孔雀石绿经过水120d的水浴之后仍含有((7.6士4.5) ug/kg和(12.0士6.7)ug/kg的残留量。翟毓秀等研究表明,孔雀石绿主要会蓄积在受精卵、血清、肌肉、肝、肾以及其他组织中。他们对姑鱼的孔雀石绿药浴实验显示,孔雀石绿在7d内从707ug/kg消减到17ug/kg,而无色孔雀石绿则从834ug/kg消减到451 ug/kg 。

  1.4 孔雀石绿的毒性

  孔雀石绿及代谢产物脂溶性无色孔雀石绿,在生物体内残留时间长,均具有高毒性、高残留、致突变、致畸性和致癌的“三致”危险。有研究表明,孔雀石绿对水生动物的毒性较强,如对翘嘴红铂、虹蹲鱼苗、加州妒鱼和对虾虾苗的安全浓度分别为0.031, 0.025,0.02和0.O1 mg/L,这比孔雀石绿的有效用药浓度0.10 -0.20 mg/L低,因此孔雀石绿在上述水产养殖动物中使用是不安全的。此外,孔雀石绿对鱼类的毒性还随着暴露时间、温度和浓度的增加而增强!孔雀石绿进入人体后,经还原酶的催化作用产生的代谢产物无色孔雀石绿会长期蓄积在人体肝脏、肾脏、血液、皮肤中和其它内脏器官中,人体对其消除速度及其缓慢,甚至会遗传给下一代。其代谢产物经过甲状腺过氧化物酶(TPO)的璀化作用后,无色孔雀石绿脱甲基之后生成芳香胺等初级和次级代谢产物,这些代谢产物的结构跟有致癌作用的芳香胺的结构相似,可以直接或者酯化之后与DNA产生反应,生成DNA加合物结构物质,这就是其潜在的结构致癌性[7]。

  孔雀石绿可以引起肾小管壁细胞的胞核破裂、溶解和固缩化,可以引起鱼类的鳃、皮肤的上皮细胞产生轻度的炎症,会导致鱼类的肝脏的充血和局部性坏死,它还会导致鱼类肾脏的近曲小管上皮出现超常增生的情况,致使管腔发生轻度扩张的状况,甚至会引起上皮层产生脱落、空泡化现象。此外,孔雀石绿也会导致肠道上皮细胞、小肠绒毛发生蜕变和脱落的现象,甚至降低鱼类血清中钙及蛋白质的含量,阻碍肠道中胰蛋白酶和α淀粉酶等酶的作用,从而会影响鱼类的正常摄食以及他们的生长发育。

  表 1 孔雀石绿对不同生物的毒性效应

  种类毒性效应目标物文献

  浮游植物可导致叶绿素 b 和类胡萝卜素含量降低, 抑制叶绿素

  形成和光合作用, 从而抑制藻类生长。对金藻的毒性

  大于小球藻。 金藻 Isochrysis zhan jiang ensis;

  小球藻Chlorella pyrenoidosa

  李红霞[8]等

  水生动物引起急性锌中毒; 减少肠道酶分泌, 抑制摄食及生

  长, 降低排泄、解毒等功能, 导致染色体异常, 胚胎

  存活率下降, 受精卵及幼体发育畸形; 对呼吸系统酶

  有毒性作用, 导致呼吸抑制; 对多种器官(鳃、肝脏、

  肾脏等)具有发育毒性, 导致细胞坏死或引起鱼类贫

  血; 可能损害线粒体, 使细胞核异常。 虹鳟 Oncorhynchus mykiss;

  罗非鱼(英文通称: Tilapia);

  鲇鱼 Silurus asotus;弹涂鱼Boleophthalmus pectinirostris; 鲈 鱼Lateolabrax japonicus; 黑 鲷 Sparus macrocephlus;对虾Penacus orientalis; 东风螺Babylonia formosae habei 等

  黄英等;Gerundo et al.;Meyeret al;Rao

  

  哺乳动物抑制胆碱、胆酶活性, 体重下降, 使多处器官和细胞

  发生肿瘤或病变几率增加, 导致基因突变 叙利亚仓鼠 Mesocricetus auratus、大鼠Rattus norregicus 、 小 鼠 Musculus 、 兔Leporidae、人 Homo sapiens 等

  Rao;Culp et al; Rao et al; Panandiker et al[2.孔雀石绿的检测方法

  水产品营养丰富,富含不饱和脂肪酸和各种微量元素、矿物质,中国是世界上最大的水产品出口国,但是由于孔雀石绿残留的问题影响了对外贸易,造成了巨大的经济损失,严重影响了我国出口水产品安全的声誉。

  孔雀石绿的残留检测方法主要有理化检测法和免疫学检测法两大类。理化检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、薄层色谱法(TLC)、分光光度法(UV-VIS),液相色谱质谱联用检测法(HPLC-MS)等,免疫学检测法主要包括酶联免疫检测法。后来出现了表面增强拉曼光谱的新型检测方法。常用薄层色谱法、分光光度法以及液相色谱法灵敏度达不到欧盟标准,色质联用以及酶联免疫吸附(ELISA)灵敏度达到欧盟要求,但测试操作复杂繁琐,仪器设备昂贵,不便携,只能在实验室使用,不受到用户商家的欢迎。不同方法特点及其局限性不同。近年来,国内外学者对现有的各种方法加以优化,以寻求一种高灵敏度、高准确度、高效快速的便捷的现场检测方法。

  2.1 理化检测方法

  2.1.1薄层色谱法(TLC)

  薄层色谱法(TLC),别名薄层分析,是在玻璃板、塑料或铝基片上涂布一层适宜的支持物为固定相,形成一片均匀的薄层,再用合适的溶剂当作流动相。经过点样、展开之后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,对混合物进行分离、鉴别、杂质检查或含量定量测定的一种层析分离技术。薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它的作用机理是利用各组分对同一吸附剂吸附能力不相同,使得在移动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。薄层色谱法从50年代开始出现,发展至今,应用广泛,其可以对少量物质诸如核苷酸、脂肪酸、氨基酸、生物碱、类固醇及其他多种物质的进行高效快速分离以及定性分析,通常也用于跟踪反应进程。

  Edelhaeuser[17]等人曾用薄层层析法 (TLC),在硅胶薄层板上涂荧光指示剂,检测水产样品中的孔雀石绿的残留量。该方法简便快速,但是因其不能同时检测孔雀石绿和无色孔雀石绿的残留总量,灵敏度低,定量分析误差很大,通常只是用于定性分析,一般不用于残留量的检测。

  2.1.2分光光度法(UV-VIS)

  分光光度法是通过测定被测物质,在特定波长处或一定波长范围内光的吸光度或发光强度,对该物质进行定性和定量分析的方法。Safarik等曾用分光光度法(UV-Vis) 检测水样中孔雀石绿的含量,该方法由于灵敏度较低,没有分离功能,定量分析误差大,准确性较差,而且也不能检测无色孔雀石绿,仅局限于水样中孔雀石绿含量的检测,在复杂样品中难以应用。

  林谦[18]等采用紫外分光光度法,先将孔雀石绿固体用乙睛溶解,进行水产品中孔雀石绿的含量的检测。实验测定的结果表明:孔雀石绿的最佳吸收波长为619nm,紫外分光光度法的线性范围为0.08-70μg/mL,线性系数R为0.9993,最低检出限为0.02μg/mL。在0.100,1.00,l0.0μg/mL 3个浓度中,其水平加标回收率是93.5%一99.0%,相对标准偏差为0. 09%一0.43% (n=3);实验中,经过连续测定这3个浓度水平的吸光度共11次之后,得RSD的范围为0.17%一0.35% (n=l1)。该方法操作快捷,检测迅速,成本较低,准确度较高,比较适用于可一些对产品中孔雀石绿的含量的常规分析。

  莫利[19]等进行分散液液微萃取条件的优化,分别对萃取剂和分散剂的种类、萃取剂的体积、分散剂的体积、萃取的时间和离心的时间、盐浓度和共存离子的影响等影响萃取效率的因素进行了优化,建立了用于检测水样中的孔雀石绿的残留量的简便、快速、有效的分散液液微萃取粉光光度法。优化的萃取条件下,分散液液微萃取紫外可见分光光度法的线性范围为8—1000μg/L(r= 0. 9992),相对标准偏差(R SD)为4. 1% (C=100μg/L,n= 6),检出限为4. 20μg/L[ ]。选取3种实际水样进行孔雀石绿含量的测定,最后达到其加标回收率在74. 7%—108. 2%之间(n= 5)。张彦青等先将水样对甲醇、乙醇、乙睛、四氢吠喃四种分散剂和二氯甲烷、四氯化碳、溴乙烷三种萃取剂进行优化选择,选择最优的萃取剂和分散剂,并对萃取剂和分散剂的用量进行优化,选择最佳的萃取时间和离心时间。在优化的萃取条件下,检测水样中的孔雀石绿,分光光度计法测得最终的线性范围为4-1100ug/L,其加标回收率在95.9%-105.6%之间。该方法具有操作步骤简单,检测速度快、成本低,保护环境的优点。分散液液微萃取紫外可见分光光度法比较适合检测水样中的孔雀石绿含量,它具有快速、简便、检出限低、线性范围广的特点,其精确度达标,准确度符合水中痕量孔雀石绿含量的测定。

  2.1.3高效液相色谱法(HPLC)

  高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography / HPLC)也可以称为 "高压液相色谱"或者"高速液相色谱"或者"高分离度液相色谱"、"近代柱色谱"等。高效液相色谱是以液体作为流动相,利用高压输液系统,将具有极性不相同的单一溶剂或者比例不相同的混合溶剂、缓冲液等流动相直接泵入装有固定相的色谱柱中,各成分在柱内会被分离,再进入检测器后进行相关检测,由此实现对试样的分析的目的。高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点:高压、高效、高灵敏度、应用范围广、分析速度快、载液流速快。此外,高效液相色谱的色谱柱可反复使用、样品不会被破坏、容易回收等特点。高效液相色谱有“柱外效应”的缺点。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间,譬如柱接头、进样器、连接管、检测池等中,如果流动相的流型发生变化,被分离物质的任何扩散和滞留将会显著地导致色谱峰的的峰宽加宽,柱效降低。

  2.1.3.1高效液相色谱法

  由于孔雀石绿具有高沸点,不易挥发的性质,高效液相色谱分析法被广泛应用于水产运输过程中孔雀石绿残留量的定量检测,根据检测的峰高法或者峰面积法对应相应浓度。 向仲朝等采用高效液相色谱法对样品的测定条件、提取方法、线性范围、精密度、准确度等进行实验,样品用乙睛直接提取,在不加衍生试剂的情况下,不采用柱后衍生的方法,选用最合适的色谱柱在波长不同的情况下同时对样品中孔雀石绿、色孔雀石绿的含量进行测定。实验结果显示,利用高效液相色谱法测得的最低检出浓度为0.0020 mg/kg。对于加标量分别为0.025 mg/kg和0.050 mg/kg的样品,连续测定5次后,相对标准偏差RSD为2.8% -9.1%,回收率为72% -96%。研究表明,虽然高效液相色谱分析法应用普遍,实用性强,灵敏度较高、准确度较好,可以用来检测生物体内以及一些复杂基质中的孔雀石绿及其代谢产物无色孔雀石绿,但是它的灵敏度 (2 µg/kg) 未达欧盟标准,设备不便携,样品需要前处理,不方便现场快速检测。

  2.1.3.2高效液相色谱紫外检测法

  我国国家标准GB/T19857-2005[23]为了将无色孔雀石绿衍生成孔雀石绿,就是利用柱后衍生法,在液相色谱柱和紫外一可见光检测器之间接上填充二氧化铅的衍生柱。Lee采用高效液相色谱紫外检测法在波长618nm和588nm的条件下,同时对水产品中孔雀石绿和结晶紫的残留量进行检测,并且通过 LC-ESI-MS/MS方法进行定性,证实了两者确实是所需要的检测目标,其中孔雀石绿和 隐性孔雀石绿的回收率分别为 74.8%-83.8%和 80%-88.4%。高效液相色谱紫外检测法和高效液相色谱荧光检测法是目前为止最主要的高效液相色谱法。不管是紫外还是荧光检测,这两种技术均满足食品药品监督管理局( KFJ) 以及欧共体( CA) 规定的灵敏度要求。

  2.1.3.3高效液相色谱荧光检测法

  孔雀石绿的代谢产物无色孔雀石绿在水溶液中显无色,虽然肉眼看不到,但是无色孔雀石绿具有荧光特性,所以可以采用荧光分光光度计或者高效液相色谱的荧光检测器进行测定。国标GB/T20361-2006就是在样品前处理过程中加入硼氢化钾,先让孔雀石绿发生还原反应成为无色孔雀石绿,再通过荧光检测器进行测定其含量。该方法是因为无色孔雀石绿具有荧光特性以及荧光检测器的高灵敏度和选择性,有效地提高了孔雀石绿检测的灵敏度,其检测限可以达到0.51ug/ kg-1。但是使用该方法,样品前处理要求比较高,在样品前处理的过程中一定要保证所有的孔雀石绿都完全转化成无色孔雀石绿,这在操作上存在一定的难度。李秀霞[28]总结前人的经验,对固相萃取柱以及洗脱条件进行了一定程度的优化,然后结合了高效液相色谱一荧光检测器检测水中孔雀石绿的含量。该检测方法需要消耗的有机溶剂含量少,其回收率和精密度均能达到液相色谱检测的要求。

  2.1.3.4 分子印迹-固相萃取-高效液相色谱法

  分子印迹技术通过制备对待测分子具有特异选择性的分子印迹聚合物(MIP),利用MIP作为SPE填料制作固相萃取柱,可提高选择性吸附的特异识别能力。张红园等先对样品进行前处理,采用固相萃取技术对样品中的孔雀石绿进行富集和分离,再制备具有高选择性吸附的分子印迹材料,采用高效液相色谱法对水产品中的孔雀石绿残留量进行检测。研究表明,该方法的准确度较高,检出限也符合我国相关标准。

  2.1.3.5超高效液相色谱法

  随着科技的进步,近几年在高效液相色谱法的基础上发展出的超高效液相色谱(UPLC)能更好地使待测物与抑制电离的基质分离开来,以降低基质对质谱检测的干扰,同时显著地提高了分离效率,从而大大提高了孔雀石绿与隐性孔雀石绿定量的准确性。

  田秀慧[30]等采用超高效液相色谱一串联质谱法对鱼苗中孔雀石绿及无色孔雀石绿残留量进行内标法定量检测。用该方法的线性范围为0.5~20.0ng/mL,相关系数为0.9991和0.9999,检出限为0.03μg/kg,定量限为0.10μg/kg,在0.10、1.0μg/kg和2.0μg/kg三个水平加标平均回收率分别为84.3%~100.7%,相对标准偏差(RSD)为4.12%~9.18%。该方法进行了优化,准确度好,灵敏度较高。

  梅光明等采用超高效液相色谱一串联质谱法对水产养殖的水体中孔雀石绿及隐色孔雀石绿的含量进行检测。先用甲酸酸化水样进行预处理后,然后用多壁碳纳米管固相萃取柱将目标物进行富集和净化处理,再用超高效液相色谱进行分离,采用三重四级杆质谱检测,最后采用氛代同位素内标定量检测. 该方法操作简单,检测高效快速,前处理成本低,高灵敏度,高重现性,高回收率,较为适合养殖水体中孔雀石绿的残留检测。

  2.2 免疫学检测法

  2.2.1酶联免疫法(ELISA)

  酶联免疫法的全称为酶联免疫吸附剂测定法(ELISA),它是以免疫学反应为基础,将固相载体作为免疫吸附剂,把抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的高灵敏的检测技术。在实际应用中,设计不同,具体方法也不相同,大致有:用于抗体检测的间接法、用于抗原检测的双抗体夹心法和用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。目前较为常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。

  黄向荣等采用酶联免疫法检测鱼样中的隐性孔雀石绿,他们以苯甲酸甲脂和六次甲基四胺作为原料,首先进行隐性孔雀石绿的半抗原的合成,再将其跟载体蛋白进行偶联,制备得到完全抗原,随后对完全抗原进行紫外鉴定,制备得到抗隐性孔雀石绿抗体,从而建立隐性孔雀石绿酶联免疫试剂盒。王权[33]等采用抗无色孔雀石绿单克隆抗体建立了水产品中孔雀石绿残留的间接竞争ELISA检测方法。酶联免疫法是一种免疫学检测方法,因而其具有特异性、敏感性。利用其测定水产品中孔雀石绿残留的具有快速,高灵敏度的特点,比较适合用于大批量样品的筛选,但是该方法存在只能测定孔雀石绿残留的总量,对于复杂基质测定结果的假阳性几率高,检测过程复杂繁琐,受限于实验室,不便携等缺点。

  2.2.2胶体金免疫层析法(GICA)

  胶体金免疫层析法是20世纪80年代发展的基于抗原与抗体的特异性反应所进行的新型检测技术。该方法的原理是将硝酸纤维素膜当做载体,使滴在膜条一端的液体在微孔膜的毛细管作用下相另一端渗移,随后抗原抗体结合,利用胶体金所表现出的颜色反应达到检测抗原或抗体的目的。

  桑丽雅[34]等成功研制出胶体金快速检测试剂板,可以进行孔雀石绿半定量检测,通过肉眼判定该方法的最低检测限是1μg/L。山珊等基于竞争抑制反应原理,成功研制出孔雀石绿胶体金免疫层析试纸条,他们通过胶体金读取仪,读取试纸条上检测线(T线)及质控线(C线)的吸光度,从而达到定量检测水产品中孔雀石绿的目的。结果表明:当以以T/(T+C)值为纵坐标建立模型时,其线性关系好,而且变异系数小,检测灵敏度可以达到3μg/L,因此该检测方法较为理想。胶体金免疫层析法具有低成本、专一性强、操作简单、稳定性好、快速、高灵敏、不受检测条件限制的优点,因此特别适合现场检测需要,但是在检测实际样本时,对于成分复杂、种类繁多的待检样品,特异性不强的抗体容易与目标物的结构类似物发生交叉反应。此外,该方法为的检出限会因样品基质的不同而在在一定范围内产生波动,出现假阳性。

  2.3 其他检测方法

  2.3.1 表面增强拉曼光谱检测法(SERS)

  孔雀石绿是一种阳离子含胺染料,它和它的代谢产物无色孔雀石绿都是对称结构,因此具有高度表面增强拉曼活性,可以通过表面增强拉曼光谱法进行检测。顾振华等使用便携式拉曼光谱仪,基于表面增强拉曼光谱技术对水产品运输过程水样中孔雀石绿的进行快速测定。根据孔雀石绿在432-437cm-1,1166 -1170 cm-1,1613-1617cm-1的拉曼光谱特征峰和强度,定性及半定量的快速测定孔雀石绿。该方法的检测限为5. 0μ/L,检测时间仅需3min。

  SERS检测法的检测限可低至10-12 mol/L,比常规测试方法灵敏度高1000倍以上。而且,该方法定量误差小,重现性好,并且操作简单,快速,仪器电池供电,可户外现场快速检测。此外,水以及众多蛋白和糖类对检测几乎无干扰,可以在生物基质中直接测量。但是,SERS的信号强度由表面增强纳米基底的稳定性、适应性及增强效果决定,因此影响该方法对样品的检测能力。当检测复杂基质的样品时,需要优化SERS基底性能及检测条件,以获得可重复的结果。

  3. 结语

  水产品中添加孔雀石绿严重危害了我们的健康,因此建立一种高灵敏、低成本、快速、便捷、现场孔雀石绿的检测方法有着重要的意义。综上所述,目前的检测方法中,较为公认的标准是色谱一质谱检测法。但是,在实际检测中,基层单位监管和中小型企业自检需求的“手提箱检测室”要求达到便携、操作简单,又能快速、准确、自动给出可靠定量数据的要求。因此,拉曼光谱法和胶体金免疫分析法有更大的前景。

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